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Gibco 新一代基础培养基在提高CHO细胞表达方面的应用

Gibco ExpiCHO stable production medium (以下简称ExpiCHO SPM) 稳定生产型培养基沿用Gibco AGT 专利技术，它是一种无蛋白质、无水解物、无生长因子、无任何动物来源成分的一款化学成分限定的培养基， ExpiCHO SPM支持从瞬转到稳转的简单过渡，提供细胞高表达量而不需要额外的培养基优化，既可以作为单克隆培养基，提高单克隆的形成率，也适应于所有CHO细胞的大规模批量培养。

目前ExpiCHO SPM培养基已成功应用于生物制药领域中CHO细胞的大规模批量培养，ExpiCHO SPM适用于不同的CHO细胞类型，如Horizon HD-BioP3，CHO-K1， Lonza‘s CHOK1SV GS-KO, CHO-S等细胞系。

Case #1：ExpiCHO SPM在Horizon HD-BioP3某克隆细胞系上的应用

细胞系：Horizon HD-BioP3;

培养基：Gibco ExpiCHO SPM ，Gibco Dynamis， Medium A 和Feed A (来自供应商C)

培养方式：Batch & Fed-batch

实验结果分析：

Fig 1, Horizon HD-BioP3细胞在batch实验中的生长曲线

由图1可以得知，在Batch实验中，Horizon HD-BioP3细胞在ExpiCHO SPM和Dynamis两种培养基中的细胞密度最高分别可达13.2*10⁶cells/ml和13.8*10⁶cells/ml，细胞活率在第6天时均大于98%；

Fig 2, Horizon HD-BioP3细胞在fed-batch实验中的生长曲线

Fig 3，不同培养基条件下D14的titer值

由图2可以得知，细胞在Dynamis + Feed A和ExpiCHO SPM + Feed A培养基中组合培养基中的细胞生长都很好，细胞密度最高分别可达38.6*10⁶cells/mL和37.9*10⁶cells/mL，而在Medium A+ feed A的细胞生长略逊于Dynamis + Feed A和ExpiCHO SPM + Feed A；从细胞表达产量看（Fig 3），细胞在ExpiCHO SPM+ Feed A中D14的titer最高，其值为4191mg/L,比Dynamis+ Feed A组的titer高了27%，比Medium A + Feed A 的titer高了76.3%；这说明ExpiCHO SPM在提升蛋白表达方面有着明显的优势。

Case# 2, ExpiCHOSPM在某CHO-K1细胞系上的应用

细胞：CHO-K1，来源ATCC

培养方式：Fed-batch

培养基：ExpiCHO SPM， Medium A和Feed A（来自供应商C）,

补糖策略：低于4g/L时补至6g/L

实验结果分析：

Fig 4, 细胞生长曲线

Fig 5, 细胞蛋白表达Titer

Fig 6，细胞培养过程中代谢参数

由图4-6可以得知，CHO-K1细胞株在Expi CHO中的细胞生长，蛋白产量和代谢参数与Medium A相比都更优异，其中，与Medium A相比，提前两天达到最高细胞密度，最高细胞密度为18.8*10⁶，较Medium A高36%，D14的titer为7.046g/L，比在Medium A中的提高了约10%；此外，细胞在ExpiCHO SPM培养基中的乳酸代谢含量可以控制在很低的水平（小于0.2g/L）,可以使细胞处于一个比较良好的生长环境中。

Case#3，ExpiCHO SPM在某 CHO-S细胞系表达融合蛋白的应用

细胞株：ExpiCHO-S

培养方式：Batch

培养基：ExpiCHO SPM ，ExpiCHO expression medium ，CD CHO medium ，Medium A/B/C/D/E/F（来自不同的供应商）

Fig 7，细胞在不同培养基中的细胞密度和活率

Fig 8，细胞在不同培养基中的蛋白表达

由图7和图8可知，在Batch实验中，相较其它培养基而言，该细胞在ExpiCHO SPM中的细胞表现最好，titer可达1.348g/L。

通过以上3个案例说明，ExpiCHO SPM 培养基在细胞生长和细胞蛋白表达方面都有着优异的表现。此外，它在用于培养Lonza CHOK1SV GS-KO细胞系时，还可以缩短细胞的倍增时间，提升抗体产物的质量（如可降低双抗分子的错配率等）。总之，ExpiCHO SPM是一款适用于CHO细胞大规模培养的高表达的性能优良的培养基，可以有效地赋能CHO细胞生产高表达高质量的蛋白产物。

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